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培养纯菌种可以用哪些方法

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培养纯菌种可以用哪些方法

发布日期:2019-11-20 作者: 点击:


       培养纯菌种可以分为三个步骤,分别是培养母种,培养原种和培养栽培种。你知道培养纯菌种可以用哪些方法吗?来学习一下吧!

        一、木棒培养母种

        这种方法适用于木耳、香菇和银耳等生于段木上的食用菌。选出菇最多,生长最好的段木,并将其上出菇最多的一节锯下来,长约3厘米,去树皮。将心木放入75%酒精中消毒2分钟,用蒸馏水冲洗干净,用消毒纱布擦干。再用刀纵劈成3厘米长的木条,形状像火柴棒,棒中长满了菌丝。用镊子夹取1条,斜插在试管中马铃薯洋菜培养基的斜面上。将试管放在25℃的环境中培养,约30天,菌丝长满培养基,就可以得到我们需要的母种了。

        这个方法有以下几个特点。第一个,容易感染杂菌。因此,段木用75%酒精消毒后,仍应在培养基中加些链霉素、青霉素或金霉素等,其用量是每毫升中加30单位(或1000毫升中加40微克),以抑制杂菌。第二个,无性繁殖,菌丝为双核菌丝。第三个,对银耳来说,木条中已有两种菌丝。接种后,银耳菌丝与香灰菌丝同时生长,香灰菌丝由白色变成浅灰色,培养基由黄变黑,这表明香灰菌丝成熟,而不是杂菌。

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        二、木塞培养栽培种

        用打孔器,在桑、榆、槐、乌柏、重阳木、无患子、栗和悬铃木等硬木上打孔,取下圆柱形的木塞,直径约1厘米,长约1.5厘米。将木塞浸入水中24小时,使其吃透水分,再取出沥水,按其干重的3份比例,加入锯末培养基2份,拌和均匀。然后进行装瓶,在750毫升的广口瓶中,可装木塞200~300个,其间用锯末培养基填充。在高压灭菌锅中加压灭菌2小时后,放凉,即可接入原种。在25℃的室内培养30天,菌丝长满全瓶,即为栽培种。

        木塞栽培种,适用于段木栽培香菇、木耳和银耳等。如果有意识地选择直径10-20厘米的段木,按行距5厘米,株距10厘米的距离,梅花形打孔取木塞,培养成栽培种,则在接种时,将木塞从栽培种瓶中取出来,直接放回原来的孔中,木塞中长满了菌丝,即生入段木中。菌种瓶中充满着锯末培养基,也是栽培种,可在段木上砍花接种。木塞也可以是楔形的,其基部为长方形,1×0.5厘米,长1.5厘米,垂直向下或与段木倾斜约30度。

        三、培养银耳芽孢菌种

        银耳的孢子落在普通的马铃薯洋菜培养基上,经数天后,孢子群成为乳白色,半透明,粘稠,边缘光滑,中央隆起的菌落,这不是菌丝群落,也不是杂菌,而是芽孢菌落。芽孢是真菌繁殖的一种方式,酵母菌就是用芽孢繁殖的,芽孢不能连接成很长的菌丝。如果把这种芽孢菌落转接在试管中的普通马铃薯洋菜培养基上,仍生成芽孢菌落。如果将蒸馏水注入到试管中,用接种针将芽孢菌落刮下来成为芽孢悬浮液,将这悬浮液倒入锯末培养基中,则能发育成为菌丝,制成原种。

        如果在配制马铃薯洋菜培养基时,将洋菜增为25克,并加入过磷酸钙0.3克,以此来增加培养基的浓度和营养,则银耳的孢子在这种培养基上,就能萌发成菌丝。将芽孢转接在这种培养基上,也能萌发成菌丝。在普通的马铃薯洋菜培养基中,加入银耳锯末菌种的煮出液,也能促使银耳的孢子和芽孢萌发成菌丝。


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